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細胞培養(yǎng)瓶的實驗步驟介紹

日期:2020-09-23瀏覽:1389次

  細胞培養(yǎng)瓶濾膜蓋設(shè)計便于內(nèi)外氣體交換,有效防止污染,人體工學(xué)設(shè)計,方便取用;短而寬的瓶頸,方便移液管和細胞鏟的出入。
  培養(yǎng)基或細胞懸液傾倒流暢,而不會引起細胞殘留損失和細胞污染。此外,圓管狀瓶口的非對稱鋸齒形截面的雙線螺紋設(shè)計,使瓶蓋旋轉(zhuǎn)角度較小,自鎖性更好,轉(zhuǎn)動順暢,擰緊和松開操作方便;且瓶蓋旋緊后受力均勻,瓶蓋的密封性能更好,降低了細胞污染幾率。
  細胞粘附性強,具有更高的細胞貼壁率和細胞存活率;培養(yǎng)表面光潔,無劃痕或波浪紋等瑕疵;液體傾倒流暢,瓶蓋自鎖性好,使得瓶蓋密封性更好。
  當(dāng)培養(yǎng)一種新的細胞系時其原則按 1:2 和 1:4 的比例傳代細胞,在 3~4 天時間內(nèi)進行細胞計數(shù)以計算每毫升細胞數(shù)。細胞在傳代后 24~36 小時細胞數(shù)會翻倍。傳代細胞密度低,細胞容易死亡,反映出細胞在達到增長前有較長滯留期。一旦細胞適應(yīng)實驗室的培養(yǎng)條件冉?jīng)Q定備細胞株的佳接種密度。
  細胞培養(yǎng)瓶實驗步驟
  1、 如果細胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋,即可將細胞從細胞瓶表面分離下來。
  2、輕輕地吹打細胞(移液管上下吹打),將細胞團吹散。
  3、取1ml 細胞懸液進行細胞計數(shù),勿讓細胞沉積在瓶底。輕輕來回轉(zhuǎn)動細胞瓶使細胞處于懸浮狀態(tài)。
  4、稀釋細胞,使其濃度約為每毫升 2x105~4x105。
  5、進行細胞計數(shù),并用臺盼藍排斥試驗進行細胞活力檢測。

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